細胞增殖及毒性檢測CCK試劑盒——CCK8
一、包裝規格
貨號：K009-100、 K009-500、K009-1000、K009-3000
規格： 100T 、 500T 、 1000T 、 3000T
儲存條件: 4℃避光保存，有效期一年。
二、產品說明
Cell Counting Kit 簡稱 CCK 試劑盒，為 MTT 法的替代方法，是一種基于 WST（水溶性四唑鹽，化學名：2-(2-甲 氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
CCK 法與其它檢測方法之間的比較：
CCK 用途：藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定等
三、操作說明
Ⅰ、制作標準曲線（測定細胞具體數量時）
1、先用細胞計數板計數所制備的細胞懸液中的細胞數量，然后接種細胞。
2、按比例（例如：1/2 比例）依次用培養基等比稀釋成一個細胞濃度梯度，一般要做 3-5 個細胞濃度梯度，每組 3-6 個復孔。
3、接種后培養 2-4 小時使細胞貼壁，然后加 CCK 試劑培養一定時間后測定 OD 值，制作出一條以細胞數量為橫坐標（X 軸），OD 值為縱坐標（Y 軸）的標準曲線。根據此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數量（試用此標準曲 線的前提是實驗的條件要一致，便于確定細胞的接種數量以及加入 CCK 后的培養時間。）
Ⅱ、細胞活性檢測
1、在 96 孔板中接種細胞懸液（100μL/孔）。將培養板放在培養箱中預培養（在 37℃,5% CO2 的條件下）。
2、向每孔加入 10 μL 的 CCK 溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響 OD 值的讀數）。
3、將培養板在培養箱內孵育 1-4 小時。
4、用酶標儀測定在 450nm 處的吸光度。
5、如果暫時不測定 OD 值，打算以后測定的話，可以向每孔中加入 10 μL 0.1M 的 HCL 溶液或者 1% w/v SDS 溶 液，并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。在 24 小時內吸光度不會發生變化。
Ⅲ、細胞增值-毒性檢測
1、在 96 孔板中配置 100μL 的細胞懸液。將培養板在培養箱預培養 24 小時（在 37℃，5% CO2 的條件下）。
2、向培養板加入 10μL 不同濃度的待測物質。
3、將培養板在培養箱孵育一段適當的時間（例如：6、12、24 或 48 小時）。
4、向每孔加入 10μL CCK 溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響 OD 值的讀數）。
5、將培養板在培養箱內孵育 1-4 小時。
6、用酶標儀測定在 450nm 處的吸光度。
7、如果暫時不測定 OD 值，打算以后測定的話，可以向每孔中加入 10 μL 0.1M 的 HCL 溶液或者 1% w/v SDS 溶 液，并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。在 24 小時內吸光度不會發生變化。
注意：如果待測物質有氧化性或還原性的話，可在加 CCK 之前更換新鮮培養基（除去培養基，并用培養基洗滌細胞兩次，然后加入新的培養基），去掉藥物影響。當然藥物影響比較小的情況下，可以不更換培養基，直接扣除培養基中加入藥物后的空白吸收即可。
備注：
①建議先做幾個孔摸索接種細胞的數量和加入 CCK 試劑后的培養時間。
②有條件的情況下建議采用多通道移液器，可以減少平行孔減的差異。加入 CCK 試劑時， 建議斜貼著培養板壁加，不要插到培養基頁面下加，容易產生氣泡，會干擾 OD 值讀數。
③白細胞可能需要培養較長時間。
④當使用標準 96 孔板時，貼壁細胞的最小接種量至少為 1,000 個/孔 (100 μL 培養基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低，因此推薦接種量不低于 2,500 個/孔 (100 μL 培養基)。如果 要使用 24 孔板或 6 孔板實驗，請先計算每孔相應的接種量，并按照每孔培養基總體積的 10% 加入 CCK 溶液。
⑤如果沒有 450nm 的濾光片，可以使用吸光度在 430-490 nm 之間的濾光片，但是 450nm 濾光片的檢測靈敏度最高。
⑥培養基中酚紅的吸光度可以在計算時，通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不會對檢測造成影響。
活力計算： 細胞活力*（％）=[A(加藥)-A（空白）]/[A（0 加藥）-A（空白）] ×100
A（加藥）：具有細胞、CCK 溶液和藥物溶液的孔的吸光度 A（空白）：具有培養基和 CCK 溶液而沒有細胞的孔的吸光度
A（0 加藥）：具有細胞、CCK 溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
*細胞活力：細胞增殖活力或細胞毒性活力 保存條件：4℃干燥避光保存，有效期一年。
僅供科學研究使用，禁止用于它用。
細胞增殖及毒性檢測CCK試劑盒系列貨號規格：
| 產品貨號 | 產品名稱 | 產品規格 |
| K009-100 | CCK | 100tests |
| K009-500 | CCK | 500tests |
| K009-1000 | CCK | 1000tests |
| K009-3000 | CCK | 3000tests |
| K010-100 | Cell Counting Sensitive Kit | 100tests |
| K010-500 | Cell Counting Sensitive Kit | 500tests |
| K010-1000 | Cell Counting Sensitive Kit | 1000tests |
| K010-3000 | Cell Counting Sensitive Kit | 3000tests |
Zeta Life介紹：
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