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    根系活力的測(cè)定

    發(fā)布時(shí)間: 2023-01-30  點(diǎn)擊次數(shù): 2739次

    原理

    根據(jù)植物礦質(zhì)吸收的理論,認(rèn)為植物對(duì)溶質(zhì)的最初吸收具有吸附的特性,并假定這時(shí)在根系表面均勻地復(fù)蓋了一層吸附物質(zhì)的單分子層。因此能根據(jù)根系的某種物質(zhì)的吸附量來測(cè)定根的吸收面積。常用甲烯藍(lán)作為被吸附物質(zhì),它的被吸附量可以根據(jù)溶液濃度的變化用比色法準(zhǔn)確地測(cè)出。已知1毫克甲烯藍(lán)成單分子層時(shí)占用1.1平方米的面積。據(jù)此即可求出根系的總吸收面積。當(dāng)根系在甲烯藍(lán)溶液中已達(dá)到吸附飽和而仍留在溶液中時(shí),根系的活躍部分能把原來的物質(zhì)吸收到細(xì)胞中去,因而繼續(xù)吸附甲烯藍(lán)。而后根據(jù)吸附量求出活躍吸收面積,可作為根系活力指標(biāo)。

    材料與儀器

    721分光光度計(jì) 小磁杯 量筒 刻度吸管

    步驟

    一、材料與設(shè)備

    1. 植物材料:最好用水培植物的根,如用砂培植物的根,在沖洗石英砂時(shí)應(yīng)十分小心,以免將根系折斷或傷害。

    2. 儀器與用具:

    (1)581G型光電比色計(jì)或721分光光度計(jì)1臺(tái);(2)小磁杯或小燒杯三只;(3)50或100毫升量筒一個(gè)(依根系大小確定);(4)刻度吸管,1ml 1支,10ml 1支;(5)試管(15×150毫升)10支;(6)量瓶,100ml 1個(gè),1000ml 1個(gè);(7)吸水紙適量;(8)試管架1個(gè)。

    3. 試劑:

    (1)0.0002N甲烯藍(lán)溶液。

    精確稱取64mg甲烯藍(lán)在燒杯中加水溶解,轉(zhuǎn)入1000ml量瓶中,加水定容,搖勻即成。此溶液每ml含有甲烯藍(lán)0.064mg。

    (2)每毫升含0.010毫克的甲烯藍(lán)溶液。

    用刻度吸管吸取0.0002N甲烯藍(lán)15.6毫升放入100毫升量瓶中,加水至刻度,搖均即成。

    二、 操作步驟

    (1)甲烯藍(lán)溶液標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作:

    取試管7支,用玻璃鉛筆編號(hào),按下表次序加入各溶液,即成甲烯藍(lán)系列標(biāo)準(zhǔn)液:

    以第一管(水)為對(duì)照在光度計(jì)下比色,讀出光密度(波長(zhǎng)660毫微米),以甲烯藍(lán)濃度為橫坐標(biāo),光密度為縱坐標(biāo)繪成標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    (2)取根系(待測(cè)植物根系)用排水法在量杯或量筒中測(cè)定其根系體積。

    (3)把0.0002N甲烯藍(lán)溶液(每毫升溶液中含有0.064毫克甲烯藍(lán))分別倒在三個(gè)編號(hào)磁杯里(或燒杯里)磁杯中溶液量約10倍于根的體積,準(zhǔn)備記下每杯的溶液用量。

    (4)取根系,用吸水紙小心吸干數(shù)次,慎勿傷根,然后順序地浸入盛有甲烯藍(lán)溶液的磁杯中,在每杯中浸1.5分鐘。注意每次取出時(shí)都要使甲烯藍(lán)溶液從根上流回原磁杯中。

    (5)從三個(gè)磁杯中各取1ml溶液加入試管,分別稀釋至10倍,用電光比色計(jì)測(cè)得其光密度,查標(biāo)準(zhǔn)曲線,求出每杯浸入根系后溶液中剩下的甲烯藍(lán)毫克數(shù)。

    測(cè)定根系吸收面積記載表

     

    (6)把結(jié)果記錄下來,并依據(jù)下式求出根的吸收面積:

    C--溶液原來濃度(mg/ml)      C'--浸根后的濃度(mg/ml)

    V--溶液量(ml)         1,2,3為編號(hào)(磁杯)


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    安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。




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