E玫瑰花環(huán)形成試驗

步驟

1.  取肝素抗凝血1 ml 加1 ml Hank's 液，混勻后用尖吸管將其加在2 ml分層液上。
 

2.  離心2000 rpm，30 分鐘，用尖吸管吸取血漿與分層液界面處富含淋巴細(xì)胞的懸液置于另一潔凈試管中。
 

3.  用Hank's 液以1000 rpm，離心10 分沖洗細(xì)胞兩次，末次棄上清后再加入Hank's液1 ml，混勻，用微量加樣器吸取0.02 ml 加于0.38 ml 白細(xì)胞計數(shù)液中，在血球計數(shù)板上于低倍鏡下計數(shù)，并根據(jù)下式算出每毫升細(xì)胞數(shù)。然后用Hank's液配制成107 /ml細(xì)胞懸液。

 

4.  取107 /ml細(xì)胞懸液0.1 ml加0.1 ml經(jīng)SRBC吸收的滅活NBS，再加0.2 ml0.5 %SRBC懸液，混勻，放37 ℃溫箱5 分鐘，低速離心500 rpm，5 分鐘，然后放4 ℃冰箱2 小時或過夜。
 

5.  取出試管，輕輕使沉淀的細(xì)胞懸浮，用尖吸管取出一滴置于載玻片上，蓋上已滴加瑞氏染液的蓋玻片，于高倍鏡下觀察計數(shù)。

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