銷售熱線

    19126518388
    • 技術文章ARTICLE

      您當前的位置:首頁 > 技術文章 > 細胞培養之“麻煩精”支原體的防治方法

      細胞培養之“麻煩精”支原體的防治方法

      發布時間: 2021-09-28  點擊次數: 1738次

      支原體是細胞培養中常見的污染,。因支原體屬于直徑介于0.2-2µm的最小原核生物,形態易變,所以即使用濾網給培養基過濾20次,它還會在已經感染的培養基中“陰魂不散",而又因為它缺少細胞壁,沒有這層外衣包裹之后的它,可以成功逃過大部分抗生素的“追殺"。在細胞培養液中,支原體可達到107-108CFU/mL(CFU=Colony Forming Unit,是一種支原體的濃度測量單位)而不使培養液混濁及影響細胞生長,而因為在初感染時它不會給細胞帶來任何影響,這一點,估計黑膠蟲都要被它隱蔽得方式折服。


      那么支原體污染對細胞有什么影響呢?

      1.支原體污染導致細胞收縮,貼壁細胞脫落裂解,細胞空泡化。。。

      2.引起細胞蛋白質、DNA、rRNA、mRNA 的合成障礙;

      3.使培養基成分發生改變(如發酵型支原體降解糖類產生酸性物質),影響細胞代謝

      4.破壞細胞膜的完整性,影響細胞信號傳遞;

      5.引起細胞的染色體異常;

      6.使惡性細胞致癌能力下降、影響淋巴細胞分化以及細胞中病毒的產量。


      支原體污染有哪些檢測方法?

      1.相差顯微鏡檢測;

      2.低張處理地衣紅染色觀察;

      3.DNA熒光染色法;

      4.電鏡檢測;

      5.3-H胸腺嘧啶摻入法;

      6.聚合酶鏈反映法;

      7.免疫學方法;

      8.支原體的培養。


      支原體污染的補救的方法:

      1.抗生素排除法:可以用5-10倍于常用量的沖擊法,加入高濃度抗生素后作用24-48小時,再換入常規培養液,有時可能有效。推薦用量:慶大霉素 200ug/ml ,四環素10ug/ml ,卡那霉素50ug/ml 。對于支原體污染抗生素應用,預防性應用比污染后使用好。

      2 . 加溫除菌:根據支原體耐熱性能差的特點。將受支原體污染的細胞置于41度中作用5-10小時可以殺滅支原體。但由于41度對培養細胞本身也有較大的影響,故處理前,應*行預試驗,確定出最大限度殺傷支原體而對細胞影響較小的處理時間。

      3.裸鼠過繼法:將支原體污染的細胞用0,25%胰酶,0.02%EDTA消化制成單細胞懸液后用PBS洗滌離心2次,調細胞密度至10^7 /ml;經小鼠背部皮下接種0.2ml細胞約10~15天后即可形成移植瘤;3~4周后無菌條件下取出移植瘤組織,剔除壞死部分,用注射器針芯在200目篩下將組織壓碎使細胞釋放入含0.1%EDTA的無血清DMEM培養液中:將細胞懸液小心加入含有淋巴細胞分離液離心管上層,室溫下水平離心 3000r/min,20min;用吸管吸出兩種液體界面層的細胞,置無血清DMEM培養液中,再用無血清DMEM將細胞洗滌離心1次,用*培養液調細胞密度至5×105個/ml,置37℃,5%CO2培養箱中培養。



    產品中心 Products
    中文精品久久久久国产网站| 久久伊人五月天论坛| 麻豆亚洲AV成人无码久久精品| 成人国产激情福利久久精品| 久久伊人五月天论坛| 日韩人妻无码精品久久久不卡 | 久久久久免费看黄A片APP| 一区二区三区久久精品| 久久青青草原精品影院| 久久亚洲精品成人AV| 精品久久久久久久免费加勒比| 久久久青草青青国产亚洲免观| 男女久久久国产一区二区三区| 精品乱码久久久久久中文字幕| 国内精品伊人久久久久av一坑| 久久人与动人物a级毛片| 婷婷久久香蕉五月综合| 狠色狠色狠狠色综合久久| 亚洲国产精品无码久久久| 亚洲国产精品一区二区三区久久| 久久精品国产精品亚洲艾草网| 伊人久久大香线蕉综合热线| 久久久不卡国产精品一区二区| 久久久久亚洲av无码专区导航| 三级韩国一区久久二区综合 | 国产精品免费久久| 色综合久久久久久久| 久久精品一区二区三区日韩| 蜜色欲多人AV久久无码| 久久精品国产亚洲av麻| 激情五月婷婷久久| 久久久久久久久无码精品亚洲日韩| 久久国产精品最新一区| 精品伊人久久久香线蕉| 无码超乳爆乳中文字幕久久| avtt香蕉久久| 久久国产成人午夜aⅴ影院| 久久久久久久精品妇女99| 思思久久精品在热线热| 亚洲精品9999久久久久无码| 久久精品国产2020观看福利|